IPTG
中文名称 异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷
外文名:IPTG
通用CAS 367-93-1
分子式 C9H18O5S
别名 Isopropyl β-D-Thiogalactoside
中文品名: 异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷
商品名称: Isopropyl β-D-1-Thiogalactopyranoside
英文简称: IPTG
产品别名: Isopropyl β-D-Thiogalactoside
通用CAS : 367-93-1
产品纯度: Sigma ≥99%, Merck ≥98% ,INALCO≥99%。
作为β-galactosidase的活性诱导物进行生物活性鉴定。
通过TLC分析确定纯度。
产品性状: 白色或白色粉末,溶于水后呈清亮无色液体
分 子 式: C9H18O5S
分 子 量: 238.30
保存温度: 2-8°C冷藏保存,配制好后保存于-20°C,室温可放置一个月
作用 :诱导外源基因的表达,普遍应用于原核表达系统,使其表达量增高,产物稳定,具有易鉴定,易纯化的优点。
用 途:IPTG是β-半乳糖苷酶的活性诱导物质。基于这个特性,当pUC系列的载体DNA(或其他带有lacZ 基因载体DNA)以lacZ 缺失细胞为宿主进行转化时、或用M13噬菌体的载体DNA进行转染时,如果在平板培养基中加入X-gal和IPTG,由于β-半乳糖苷酶的α-互补性,可以根据是否呈现白色菌落(或噬菌斑)而方便地挑选出基因重组体。此外,它还可以作为具有lac或tac等启动子的表达载体的表达诱导物使用。
IPTG(异丙基硫代半乳糖苷,Isopropyl β-D-Thiogalactoside)是一种作用极强的诱导剂,不被细菌代谢而十分稳定,因此被实验室广泛应用。
使用方法
首先把IPTG配制成23.83 mg/ml(100 mM)的水溶液,并进行过滤除菌后保存。然后在100 ml的琼脂培养基中,加入100 μl的上述溶液、200 μl的X-Gal(20 mg/ml的二甲基甲酰胺(DMF)溶液)和100 μl的Amp(100 mg/ml),制作成IPTG、X-Gal、Amp平板培养基。当DNA片段插入至pUC系列载体(或其他带有lacZ、Amp基因载体),然后转化至lacZ缺失细胞中后,涂布上述的IPTG、X-Gal、Amp平板培养基,可根据长出菌体的蓝白色,而方便地挑选出基因重组体(白色为具有DNA插入片段的基因重组体)。